如何快速判斷顯微鏡視野面積并統(tǒng)計其中細胞
方法一:
根據(jù)文獻的參考標準計數(shù),一般是高倍鏡下(x400)或(x200)隨機選取幾個視野,計數(shù)一定量的細胞,爭取做到能反映切片的全貌;也有專門的計數(shù)軟件,需要先選取視野攝像,然后通過軟件處理。
視野面積==顯微鏡目鏡的視場數(shù) / 物鏡的放大倍數(shù),
例如OLYMPUS的目鏡的視場數(shù)為22,那么10X物鏡下的視野面積為直徑為
2.2mm。
而20X的視野面積為1.1mm
關于免疫組化表達陽性的細胞,現(xiàn)在多數(shù)使用IPP軟件進行實現(xiàn)
方法二:你可以使用網(wǎng)格計數(shù),利用體視學方法進行計數(shù)細胞的面積,根據(jù)陽性細胞數(shù)所占的網(wǎng)格數(shù)目多少,一個網(wǎng)格的面積大小根據(jù)不同的網(wǎng)格來判定,這樣你就可以初步得出陽性細胞數(shù)的面積大小,具體方法你可以在維譜網(wǎng)上搜索“網(wǎng)格計數(shù)”就可以了。
方法三:是本人一些小經(jīng)驗
一個相對簡單的方法:
1、用一個顯微鏡下的標尺(也可以用一個檢驗科人工計算細胞的計數(shù)板),拍照,然后根據(jù)標尺的大小,計算出一個視野的面積(可以放大后打印出來,然后計算一張照片的大小,應該說用一般的尺子加上簡單的數(shù)學計算就可以得出來);
2、然后同等條件(放大倍數(shù)相同即可)下用數(shù)碼相機照像,電腦上數(shù)陽性細胞的個數(shù),除以面積即可得出結(jié)果。
當然,如果有圖像分析軟件,第工一步用電腦完成就更為準確和簡單了。
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