熒光顯微鏡一次PCR反應檢測到數(shù)種菌株的技巧
一般來說3-4重PCR要考慮的因素非常多,一句話:難上加難
第工一種方法:
理想化的模型,必須基于以下特點:
1)2-3個待測試菌株有合適區(qū)域設計的通用引物
2)在上下游引物之間的順序需有差異,而且差異需有各自特異性探針的設計。
想一次同時操作,需要設計出來的2-3條探針的TM值,需等于且高出引物5-10度,
其中難度非常大但是也不是不可能
第二種方法:
操作性會可操作些。但是需要細心和細致,需要用目的菌基因模板,
用一樣的引物和探針設計原則(Primer Express設置除擴增長度外,其他的必須是相似參數(shù))
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