生物發(fā)光法測(cè)量樣品中ATP含量測(cè)量微生物數(shù)量
流式細(xì)胞術(shù)
流式細(xì)胞術(shù)可快速對(duì)一個(gè)細(xì)胞群體進(jìn)行鑒定，這種鑒定基于一些參
數(shù)，如細(xì)胞形態(tài)、核酸含量和表面抗原等。細(xì)胞用適當(dāng)?shù)臒晒馑貥?biāo)記后
制成單細(xì)胞懸液，并逐個(gè)快速通過通道，同時(shí)用激光束進(jìn)行檢測(cè)。通過
分析每個(gè)細(xì)胞同激光束的相互作用(散射光和熒光)，便可獲得群體中符
合預(yù)期參數(shù)的代表性菌體細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)中，熒光標(biāo)記的抗體可被用
來直接檢測(cè)菌體細(xì)胞。在食品微生物學(xué)中，其中一個(gè)缺點(diǎn)是這種方法無
法區(qū)分細(xì)胞死活以及來自于食品基質(zhì)的干擾。
生物發(fā)光法
生物發(fā)光法通過測(cè)量樣品中ATP含量來間接測(cè)量微生物的數(shù)量。由
于只有活細(xì)胞中含有ATP，那么ATP的數(shù)量直接與樣品中微生物數(shù)量相關(guān)
。在mg2+存在時(shí)，用熒光素一熒光素酶系統(tǒng)(來自螢火蟲)可以測(cè)量所檢
樣品中裂解細(xì)胞的ATP濃度。這種方法可以檢測(cè)每克或每毫升食品中低
達(dá)10的2次方～10的3次方的活細(xì)菌細(xì)胞或10個(gè)酵母細(xì)胞，其也能測(cè)量設(shè)
備表面的微生物數(shù)量。這種方法非常迅速，并且使用這些方法的自動(dòng)系
統(tǒng)現(xiàn)在也已經(jīng)出現(xiàn)在市場(chǎng)。
在另一種方法，來自于自發(fā)光的細(xì)菌(如弧菌)中編碼生物發(fā)光的基
因(Z眥基因)已經(jīng)克隆到一些致病菌、指示菌以及腐敗菌中。熒光素酶
催化分子氧氧化黃素單核苷酸(FMNH2)和長(zhǎng)鏈脂醛并且發(fā)光。因?yàn)橹挥?br />
活細(xì)胞可以發(fā)光，克隆有發(fā)光基因的菌株可以被用來快速評(píng)價(jià)殺死細(xì)胞
或從食品及食品環(huán)境中清除細(xì)菌的一些殺菌或除菌方法的有效性及其效
果。這種方法也被用來檢測(cè)受傷不能發(fā)光、但修復(fù)損傷后仍可發(fā)光的菌
體?，F(xiàn)已經(jīng)有商業(yè)生產(chǎn)的測(cè)量反應(yīng)光強(qiáng)的自動(dòng)系統(tǒng)。
許多其他的快速方法、自動(dòng)系統(tǒng)以及傳統(tǒng)方法模型現(xiàn)在也都已商業(yè)
化。一些已經(jīng)在文獻(xiàn)中經(jīng)過詳細(xì)討論并且可以被查閱。
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